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聚合酶鏈鎖反應,Polymerase chain reaction,簡稱PCR。

Pcr

聚合酶鏈鎖反應簡圖 (1) 96℃高溫下使雙股DNA打開 (2) 在約68℃下讓引子與DNA配對 (3) 在72℃ DNA延長 (P=聚合酶). (4) 第一循環完成,做出的兩段雙股DNA又可當作下一個循環模板,這樣每次循環都使得擴增的DNA片段加倍。Ori:[1]

藥劑编辑

DNA template1 λ
Primer1 λ
Primer R1 λ
dNTP(2.5mM)4 λ
Buffer5 λ
dH2O37.5 λ
Ex taq0.5 λ
total50 λ

※請依個人實驗需要調整各樣品的量

實驗步驟编辑

  • 將混合好的樣品置入PCR儀器中
  • PCR儀器設定
  1. Denature: 96 ℃ 2min → 30sec
  2. Annealing: ℃ 30sec
  3. extension: 72 ℃ 2min 30cycle
  4. 72℃ 10min → 4℃

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